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第28章 橘子营养药用价值（第4页）

-用适当的洗脱剂对树脂进行洗脱，常用的洗脱剂有乙醇、甲醇等。洗脱剂的浓度和用量根据花青素的吸附情况而定。

-收集洗脱液，经过浓缩、干燥等处理，得到纯化的花青素。

2.凝胶过滤色谱法-原理：利用凝胶的分子筛作用，根据花青素分子大小的不同进行分离。

-纯化步骤：-将花青素提取液注入凝胶过滤色谱柱中。

-用适当的流动相进行洗脱，流动相通常为水、乙醇等。根据花青素的出峰时间收集不同的馏分。

-对收集到的馏分进行分析和鉴定，确定含有花青素的馏分，经过浓缩、干燥等处理，得到纯化的花青素。

五、质量检测与分析1.含量测定-常用方法：采用分光光度法、高效液相色谱法等方法测定花青素的含量。分光光度法是基于花青素在特定波长下的吸光度来计算含量，高效液相色谱法则可以更准确地分离和测定不同种类的花青素。

2.纯度分析-方法：通过薄层色谱法、高效液相色谱法等方法分析花青素的纯度。薄层色谱法可以初步判断花青素的纯度，高效液相色谱法则可以给出更精确的纯度数据。

3.结构鉴定-方法：采用紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振谱等方法对花青素的结构进行鉴定。这些方法可以确定花青素的分子结构、取代基类型和位置等信息。

从橘子中提取花青素是一个复杂的过程，需要综合考虑提取方法、纯化方法和质量检测等多个方面。不同的提取方法和纯化方法各有优缺点，需要根据实际情况进行选择和优化。同时，为了保证提取的花青素的质量和安全性，还需要进行严格的质量检测和分析。

从橘子中提取dNA可以通过以下步骤进行：

一、实验材料准备1.新鲜橘子：选择成熟、无病虫害的橘子，确保橘子的细胞结构完整，以便更好地提取dNA。

2.实验器具：研钵、杵、离心管、微量移液器、玻璃棒、漏斗、滤纸等。

3.试剂：洗洁精、氯化钠（食盐）、乙醇（浓度为95%或无水乙醇）、蒸馏水等。

二、提取步骤1.破碎细胞-将橘子去皮，取少量橘子果肉放入研钵中。

-加入适量的洗洁精和蒸馏水，洗洁精可以破坏细胞膜的脂质双分子层，使细胞破裂。用杵将橘子果肉研磨成匀浆状，这一步骤的目的是充分破碎细胞，释放出细胞内的dNA。

2.溶解dNA-将研磨好的匀浆倒入离心管中。

-加入适量的氯化钠溶液，氯化钠可以使dNA溶解在溶液中。一般来说，每毫升匀浆中加入1-2摩尔的氯化钠溶液。

-轻轻搅拌离心管中的溶液，使氯化钠充分溶解，然后将离心管放置在室温下静置一段时间，让dNA充分溶解。

3.去除杂质-在溶解有dNA的溶液中加入适量的乙醇，乙醇可以使dNA沉淀出来。一般来说，每毫升溶液中加入2-3倍体积的乙醇。

-轻轻搅拌溶液，使乙醇与溶液充分混合，然后将离心管放置在冰箱中冷藏一段时间，让dNA沉淀。

-取出离心管，用玻璃棒将沉淀的dNA挑出，放入另一个离心管中。

-加入适量的蒸馏水，将dNA溶解在蒸馏水中，然后用滤纸过滤溶液，去除杂质。

4.纯化dNA-将过滤后的溶液倒入离心管中，加入适量的乙醇，再次使dNA沉淀。

-用玻璃棒将沉淀的dNA挑出，放入另一个离心管中，加入适量的蒸馏水，将dNA溶解在蒸馏水中。

-重复上述步骤2-3次，以进一步纯化dNA。

5.检测dNA-取少量纯化后的dNA溶液，加入适量的溴化乙锭（Eb）溶液，溴化乙锭可以与dNA结合，在紫外光下发出荧光。

-将含有dNA和溴化乙锭的溶液放在紫外灯下观察，如果溶液发出荧光，则说明提取的dNA纯度较高。

三、注意事项1.实验过程中要注意安全，避免接触有毒试剂。

2.研磨橘子果肉时要充分，以确保细胞破碎完全。

3.加入试剂的量要准确，以保证提取的dNA质量。

4.实验操作要规范，避免污染dNA样品。

5.在提取过程中，要保持实验环境的清洁和干燥，以防止dNA降解。

通过以上步骤，可以从橘子中提取出dNA。提取的dNA可以用于分子生物学实验、基因工程等领域。

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